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技術(shù)文章

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間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）如何培養(yǎng)與鑒定？相比于胚胎干細(xì)胞或神經(jīng)干細(xì)胞，MSC具有易獲取、易體外培養(yǎng)、傳代穩(wěn)定性、低免疫原性等優(yōu)勢(shì)，在體外經(jīng)過(guò)多次傳代后仍具有多向分化和自我復(fù)制的潛能，且MSCs多來(lái)自于成年的組織，研究過(guò)程的道德和倫理學(xué)問(wèn)題較小。MSC的大小與形狀具有異質(zhì)性，即不同種屬或不同組織的MSC具有不同的生長(zhǎng)形態(tài)，例如三極形、長(zhǎng)梭形、小圓形、短梭形和扁平形態(tài)。幾乎所有的MSC都是貼壁生長(zhǎng)，具有較強(qiáng)的貼壁能力，而MSC的原代分離也正是利用了MSC強(qiáng)貼壁的特性。例如，骨髓MSC的分離方法為：將從組織中分離出來(lái)的單...

2020 10-30
關(guān)于膠原酶配置后的保存方法膠原酶是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬，內(nèi)含較多結(jié)締組織或膠原成分時(shí)，用胰蛋白酶解離細(xì)胞的效果較差，這時(shí)可采用膠原酶解離細(xì)胞法。膠原酶僅對(duì)細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對(duì)上皮細(xì)胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織，可使上皮細(xì)胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為*終濃度200U/ml（約為1mg/mL）或0.03%~0.3%。膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細(xì)胞膠原酶，要根據(jù)所要分離消化的組織類(lèi)型選擇膠原酶類(lèi)型...

2020 10-24
如何配置膠原酶膠原酶按其存在的方式不同可分為人體內(nèi)源性膠原酶和藥用膠原酶兩種。人體內(nèi)源性膠原酶是指人體內(nèi)部本身所具有的膠原酶，如牙齦、觸膜等上皮組織和關(guān)節(jié)滑膜、椎間盤(pán)內(nèi)都不同程度的存在著這種膠原酶，它在體內(nèi)膠原蛋白的分解過(guò)程中發(fā)揮著*的作用。藥用膠原酶是指利用生物制藥的高科技手段從溶組織梭狀芽孢桿菌的發(fā)酵液中提取、純化并精制而得的白色或類(lèi)白色無(wú)菌凍干粉針生物制劑。膠原酶（collagenase）是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬，內(nèi)含較...

2020 10-20
WGA技術(shù)如何選擇？單細(xì)胞全基因組測(cè)序技術(shù)是在單細(xì)胞水平對(duì)全基因組進(jìn)行擴(kuò)增與測(cè)序的一項(xiàng)技術(shù)，其原理是對(duì)分離的單個(gè)細(xì)胞的微量全基因組DNA進(jìn)行擴(kuò)增，獲得高覆蓋率的完整的基因組后進(jìn)行高通量測(cè)序，廣泛應(yīng)用于癌癥研究、胚胎發(fā)育、輔助生殖、細(xì)胞分化、免疫機(jī)制、微生物等方向的研究。獲得高覆蓋度高保真性的全基因組擴(kuò)增產(chǎn)物是準(zhǔn)確全面的測(cè)序結(jié)果的保障。為了保證基因組高覆蓋度無(wú)偏好性的擴(kuò)增，在單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)誕生的近二十年時(shí)間里，全基因組擴(kuò)增技術(shù)經(jīng)歷了幾次重大的變革，WGA主要有三種方式：DOP-PCR，MDA，MA...

2020 10-16
膠原酶的使用膠原酶的化學(xué)名為膠原蛋白水解酶，它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結(jié)構(gòu)，而不損傷其它蛋白質(zhì)和組織。膠原酶的化學(xué)本質(zhì)是一種蛋白質(zhì)，因此，它對(duì)溫度、PH和導(dǎo)致蛋白質(zhì)變性的各種因素均非常敏感，極易受到外界條件的影響而改變其本身的構(gòu)象和性質(zhì)。膠原酶是從溶組織梭狀細(xì)胞芽孢桿菌提取制備的，主要水解結(jié)締組織中膠原蛋白成分。當(dāng)擬消化的組織較硬，內(nèi)含較多結(jié)締組織或膠原成分時(shí)，用胰蛋白酶解離細(xì)胞的效果較差，這時(shí)可采用膠原酶解離細(xì)胞法。膠原酶僅對(duì)細(xì)胞間質(zhì)有消化作用而對(duì)上皮...

2020 10-16
當(dāng)ThruPLEX技術(shù)遇上FFPE樣本，會(huì)帶來(lái)怎樣的“*操作”！FormalinFixedａndParaffinEmbeddedFFPE樣本作為生物和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要樣本來(lái)源，廣受研究者的青睞。由于樣本固定和儲(chǔ)存過(guò)程中，容易發(fā)生核酸的降解和損傷，因此獲得符合測(cè)序質(zhì)量要求的文庫(kù)通常很具有挑戰(zhàn)性。那么面對(duì)做DNA-Seq的FFPE樣本，應(yīng)該如何應(yīng)對(duì)呢？“想要隨心所欲的進(jìn)行FFPE-DNA樣本文庫(kù)構(gòu)建”，這個(gè)神器值得擁有?【SMARTerThruPLEXDNA-SeqKit】“飛一般感覺(jué)”的操作FFPE樣本珍貴，擔(dān)心在文庫(kù)制備時(shí)損失？選擇它吧。該...

2020 10-12
病原微生物NGS解決方案來(lái)了，您準(zhǔn)備好項(xiàng)目了嗎？病原微生物NGS解決方案來(lái)了，您準(zhǔn)備好項(xiàng)目了嗎？人類(lèi)與感染性疾病的戰(zhàn)斗持續(xù)了幾千年。但自17世紀(jì)列文虎克用顯微鏡觀察到微生物后，人類(lèi)才逐漸認(rèn)知到了感染性疾病是由病原微生物導(dǎo)致，逐步開(kāi)啟了病原微生物的研究。主要的研究方法包括經(jīng)典的培養(yǎng)鑒定法、實(shí)時(shí)熒光定量PCR法、NGS分析、質(zhì)譜分析等多種方法。其中NGS由于可直接從宿主中快速而正確地檢測(cè)鑒別病原體的全基因組序列，以及通量高、數(shù)據(jù)庫(kù)全等特點(diǎn)，逐漸成為微生物研究領(lǐng)域的重要方法，并為后續(xù)實(shí)現(xiàn)對(duì)感染性疾病診斷、治療及預(yù)防提供技術(shù)保障。...

2020 10-12
Takara真香推薦—簡(jiǎn)便好用的液態(tài)活檢解決方案之游離DNA篇在腫瘤早期篩查研究領(lǐng)域，循環(huán)腫瘤DNA（ctDNA）一直是各大廠商、科研工作者關(guān)注的重點(diǎn)。雖然ctDNA的應(yīng)用日趨成熟，但總有一些微量的ctDNA樣本無(wú)法用傳統(tǒng)技術(shù)完成高品質(zhì)文庫(kù)的構(gòu)建，特別是在進(jìn)行腫瘤早期診斷有重要價(jià)值的稀有突變分析時(shí)。如何以微量ctDNA起始構(gòu)建可準(zhǔn)確分析稀有突變的文庫(kù)？Takara的解決方案是引入分子標(biāo)簽技術(shù)！■微量ctDNA樣本無(wú)法準(zhǔn)確分析稀有變異?自帶1600萬(wàn)分子標(biāo)簽的建庫(kù)技術(shù)了解一下ThruPLEXTag-SeqKit是Takara推出的采用莖環(huán)...

2020 10-12

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